Las fuerzas españolas al mando de Francisco Pizarro llegaron a la costa norte de Sudamérica a principios de la década de mil quinientos treinta y, aprovechando una guerra civil en el Imperio inca, capturaron al gobernante inca Atahualpa en Cajamarca en mil quinientos treinta y dos. Los hombres de Pizarro ejecutaron a Atahualpa al año siguiente y avanzaron para tomar la capital inca de Cuzco, lo que puso fin al gobierno independiente del Tawantinsuyu sobre los Andes centrales. En mil quinientos treinta y cinco, Pizarro fundó Lima en la costa del Pacífico, que pronto reemplazó a Cuzco como el centro administrativo y comercial de la región.
Las rivalidades entre los mismos conquistadores sumieron al nuevo territorio en años de conflicto interno, lo que llevó a la corona española a imponer las Leyes Nuevas de mil quinientos cuarenta y dos y establecer el Virreinato del Perú bajo un virrey nombrado por la realeza. El acceso al puerto de Lima y el descubrimiento de vastos depósitos de plata, sobre todo en Potosí, convirtieron al virreinato en la posesión española más rica e importante de Sudamérica, con envíos de plata que financiaron gran parte de la administración de ultramar de la corona.
El dominio colonial trajo una profunda perturbación a la población indígena del Perú a través de sistemas de trabajo forzado, exigencias de tributos y la imposición del catolicismo, incluso cuando un estado neoinca en Vilcabamba resistió la autoridad española hasta mil quinientos setenta y dos. El descontento por los impuestos y el trabajo forzado persistió durante generaciones, culminando en el levantamiento de mil setecientos ochenta liderado por Túpac Amaru II, descendiente del último emperador inca, que sigue siendo una de las rebeliones indígenas más grandes de la era colonial.
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